Menu

نوقشت رسالة الماجستير للباحث (سيف محمود حسن الفراجي) اختصاص علوم كيمياء الموسومة (دراسة سريرية وحركية لأنزيم التوبوايزومريز (Topo I)وعلاقته ببعض المتغيرات الكيموحيوية لمرضى داء السكري)
(Clinical and Kinetic Study of Topoisomerase I (Topo I) and relationship with Some Biochemical Parameters in Diabetic Patients) أُجريت الدراسة الحالية لتحديد مستوى انزيم التوبوايزوميريزI (topo I) والتي يعد احد الانزيمات المهمةوالمرافقة لعملية تضاعف او استنساخ الحامض النووي الـDNA , وعدد من المتغيرات الكيموحيوية الاخرى (الكلوكوز,HbA1C, هرمون الانسولين, الببتيد المرتبطC-Peptide , الكوليسترول, الدهون الثلاثية, VLDL, LDL,HDL , الكرياتينين ,البروتين الكلي, الالبومين, الكلوبيولين, المغنيسيوم Mg) لدى مرضى داء السكري, كذلك جرت تنقية انزيم التوبوايزوميريزI(topo I) من مصل مرضى داء السكري وتقدير وزنه الجزيئي التقريبي و دراسة خواصه الحركية
تضمنت الدراسة (80) حالة مرضية لمرضى داء السكري وللنوعين الاول والثاني ومن كلا الجنسين تتراوح اعمارهم بين (79-27 سنة( و(40) عينة لأشخاص اصحاء بوصفها مجموعة سيطرة وبأعمار مقاربة لمجموعة لمرضى .
بينت النتائج وجود انخفاض معنوي عالٍ (P≤0.01) في مستوى انزيم التوبايزوميريزI لدى مرضى داء السكري مقارنة بمجموعة السيطرة من الاصحاء كذلك عدم وجود فروقات معنوية في مستوى الانزيم بين الجنسين وبين الفئات العمرية المدروسة (38-27 ,50-39, >50 ) وعدم وجود فروقات معنوية في مستوى الانزيم بين مستويات كتلة الجسم BMI لدى المرضى وكذلك بين الحالة الوراثية للمرضى والاشخاص المدخنين وغير المدخنين وبين سكان الريف والمدينة, اثبتت النتائج وجود ارتفاع معنوي عال P≤0.001)) في مستوى تركيز الكلوكوز وHbA1C لدى مجموعة المرضى مقارنة بمجموعة السيطرة, و وجود ارتفاع معنوي في مستوى هرمون الانسولينP≤0.01)) لدى مجموعة المرضى من النوع الثاني للسكري مقارنة بمجموعة السيطرة و وجود انخفاض معنوي P≤0.01)) في مستواه لدى مرضى النوع الاول للسكري, كذلك تشير النتائج الى وجود ارتفاع معنوي عال(P≤0.05) في مستوى الببتيد المرتبط (C-Peptide) لدى مجموعة المرضى وللنوع الثاني مقارنة بمجموعة السيطرة و وجود انخفاض معنوي في مستواه (P≤0.05) مقارنة بمجموعة السيطرة, بينت نتائج الدراسة ايضاً عدم وجود فرق معنوي في مستوى الكرياتينين بين مجموعة المرضى والسيطرة, كذلك اظهرت النتائج وجود ارتفاع معنوي (P≤0.01) في مستوى كل من الكوليسترول والدهون الثلاثية وVLDL لدى مرضى داء السكري وللنوعين الاول والثاني مقارنة بمجموعة السيطرة مع عدم وجود فرق بين النوعين, تبين ايضاً عدم وجود فرق معنوي في مستوى HDLوLDL عند المقارنة بين مجموعة المرضى ومجموعة السيطرة كذلك اظهرت النتائج عدم وجود فرق معنوي في مستوى بروتينات مصل الدم (الروتين الكلي, الالبومين, الكلوبيولين) لدى المرضى مقارنة بمجموعة السيطرة كذلك لا يوجد فرق معنوي في مستوى تركيز عنصر المغنسيوم Mg .
درست علاقات الارتباط بين انزيم التوبوايزوميريز I والمتغيرات الكيموحيوية الاخرى و تبين ان هناك ارتباطاً معنوياً سالباً عند مقارنة مستوى الانزيم بين مجموعة المرضى ومجموعة السيطرة وعدم وجود ارتباط معنوي بين مستوى الانزيم والمتغيرات الكيموحيوية الاخرى .
كذلك شملت الدراسة تنقية انزيم التوبوايزوميريزIجزئياً من مصل مرضى داء السكري وذلك باستعمال تقنية الترشيح الهلامي والديلزة وباستعمال هلام سيفادكسG100, اذ تم الحصول على قمة واحدة في الجزء الرابع من اجزاء التنقية و بلغت درجة التنقية 17.1 بحصيلة انزيمية 108.2% وفعالية نوعية (0.189ng/mg) واجريت الدراسات الحركية للأنزيم المنقى جزئياً فكان التركيز الامثل للمادة الاساس (0.1ng), وبلغت قيمة ثابت ميكالس- منتن Km(0.033ng) والسرعة القصوى Vmax (0.90ng/ml), اما درجة الحرارة المثلى لعمل الانزيم فبلغت (37C°) في حين كان الاس الهيدروجيني pH الامثل هو(7.5). جرى تقدير الوزن الجزيئي للأنزيم المنقى جزئياً من المرضى بطريقة الترحيل الكهربائي على هلام متعدد الاكريل اميد بوجود محلول كبريتات دوديكايل الصوديوم SDS(طريقة SDS-PAGE) إذ جرى تحديد الوزن الجزيئي بالمقارنة مع المحاليل القياسية ذات الاوزان الجزيئية المعلومة فبلغ وزنه الجزيئي (66KD), كذلك جرى اختبار فعالية الانزيم بالتفاعل مع بلازميد بكتيري مستخلص من بكتريا الايكولاي (E-Coli) و عند تغيير التركيز للأنزيم وجد ان أعلى تركيز للأنزيم (0.671ng/ml) اعطى افضل فعالية لفك الشد عن البلازميد ذي التركيز (38.7ng/ml),الهدف من البحث The Aim of the study
1- دراسة مستوى انزيم التوبوايزوميريزIفي مرضى داء السكري ومقارنته بالاصحاء كمجموعة سيطرة.
2- دراسة بعض المتغيرات الحياتية السريرية لدى مرضى داء السكري مثل (الكلوكوز,ومستوىHbA1C, والبروتينات ,الدهون, الكرياتينين ,المغنسيوم ,هرمون الانسولين ,الببتيد المرتبط C-Peptde) ومقارنتها بمجموعة السيطرة من الاصحاء .
3- تنقية انزيم التوبوايزوميريز Iجزئياً من مصل مرضى داء السكري باستعمال تقنية كروموتوغرافيا العمود وتقدير الوزن الجزيئي التقريبي له.
4- دراسة حركيات الانزيم مثل درجة الحرارة والدالة الحامضية وتركيز المادة الاساس , كذلك حساب ثابت ميكالس منتن Kmللانزيم والسرعة القصوى Vmax.
5- بسبب قلة الدراسات المتعلقة بأنزيمات الحامض النووي DNAوعلاقتها بالامراض الايضية كمرض السكري مثلاً ولاهمية انزيم التوبوايزوميريزI(topo I) في العديد من العمليات الخلوية فقد ارتأينا في دراستنا هذه ايجاد العلاقة بين انزيم التوبوايزوميريزI الخاص بالحمض النووي (DNA) وعلاقته بمرض السكري للاستفادة من التغييرات في مستواه كمؤشر للمرض. الف مبارك للباحث حصولة على درجة الماجستير اختصاص كيمياء ونشكر اللجنة العلمية للمناقشة كلامن ا.د نزار احمد ناجي رئيساً ا.م.د امنه حميد احمد عضوا م.د سرحان علي سلمان عضوا ا.م.د فراس طاهر ماهر عضوا ومشرفا م.د نغم قاسم كاظم عضوا ومشرفا .

DSC 1994

Go to top